精液优化处理的方法

做试管婴儿，女方需要提供高质量的卵子，男方则要奉献优质的精子，方符合“门当户对”的条件，成就一段佳缘。今天就给大家介绍一下实验室的月老们用哪些方法筛选“男神”。

选“男神”的方法，即精液优化处理技术，它能够将精液中非精子成分（大量精浆、上皮细胞、白细胞和细菌等），以及一些大头小尾、死亡、活动不佳的低质量“渣男”进行有效剔除, 选出埋没在芸芸众生“长得帅、跑得快”的男神精子，为体外授精中精子获能奠定基础。

筛选的方法有四种，它们有各自的优缺点：

1、上游法：一种常用于精液质量较好的优化方法。将液化好的精液置于离心管底部，上方缓缓加入适量的人输卵管培养液，离心管倾斜45°置于37°C 、5%C02培养箱。一段时间后，游动能力强的精子便会聚集到液面上方，死的、老弱病残的精子就留在底部。

优点：对精子损伤小，能够得到较高活力的精子；操作简便，成本较低。

缺点：上游时间较长，回收率相对较低；无法处理液化不良的精液，对少弱精患者的精液，上游的精子可能不够多。

2、密度梯度离心法：根据好精子的密度高于死的、差的精子的特性，通过不同密度梯度液，离心后，好精子便留在离心管底部，如图。

优点：操作简便，处理时间短，实用性高，成本较低。

缺点：样本多次转移、离心，对精子有一定损伤。

3、微流控芯片法：目前已经开发了多种芯片，大多是根据精子具有贴壁、趋流游动的特性，从而达到浓缩和筛选优质精子的目的。制作材料一般为聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA)，可以根据要求，灵活设计微管道的形状和尺寸。

（几种芯片，图片来源于《SLAS Technology》）

优点：操作标准化、自动化，对精子损伤小，能够很好的筛选出高活力、形态正常的精子。

缺点：优选后的精子浓度低，可能是因为各种管道对精子要求高，不适用于质量较差精液，尤其是对少精子症患者,所以临床上还没有广泛应用。

4、透明带结合法：采用失去受精潜能的不成熟卵子去筛选高质量的精子，精子和卵透明带结合后,并不立即钻入透明带,而是被能动地粘在透明带的表面上。

优点：尽可能模拟自然选择的过程，能够客观的选择具有一定受精能力的精子。

缺点：只适合采用第二代试管技术（ICSI）的精子。

上述四种方法各有优缺点，为了能扬长补短，选出内外兼修的“男神”，提高佳缘成功率，我们中心采用的是密度梯度离心法结合上游法进行筛选。即先将精子进行密度梯度离心，再进行上游，就是笔试海选后又进行了体能复试，这样筛选出来的精子不仅活力高、受到损伤小，还能够更好地剔除杂质成分的影响,减少其对精子功能的影响,对提高精子存活率、DNA完整性具有较好作用。